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肝炎灵和苦参素及苦参碱的体外抗乙肝病毒作用的比较研究
发布日期:2016-10-18 10:09:40 来源: 浏览次数:
摘 要
目的:比较肝炎灵和苦参素及苦参碱的体外对2.2.15细胞的细胞毒性和细胞培养上清液HBsAg、HBeAg和HBVDNA表达的抑制作用。
方法:以拉米呋啶作为西药对照组,采用四氮唑还原法(MTT)检测药物对2.2.15细胞生长的毒性/抑制作用并测定TC50, 采用ELISA法检测药物作用后细胞培养上清液中HBsAg、HBeAg含量并测定相应的IC50即EC50,采用PCR扩增和动态检测法检测上清液中HBV DNA含量并测定相应的IC50即EC50,根据TC50和EC50求得相应的抑制作用的选择指数SI即治疗指数TI。
结果:肝炎灵量效抑制2.2.15细胞培养上清液HBsAg、HBeAg和HBVDNA表达。细胞毒性TC50上,拉米呋啶<苦参碱<苦参素;抑制2.2.15细胞培养上清液HBsAg和HBeAg表达EC50上,苦参素>=苦参碱<拉米呋啶;抑制2.2.15细胞培养上清液HBV DNA表达EC50上,拉米呋啶<<苦参素<苦参碱。有趣的是高剂量苦参碱和苦参素及肝炎灵致细胞毒性时,苦参碱和苦参素均致2.2.15细胞培养上清液HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表达上调。而肝炎灵致2.2.15细胞毒性同时仍明显下调2.2.15细胞培养上清液HBsAg、HBeAg和HBV DNA的表达。
讨论:肝炎灵量效抑制2.2.15细胞的HBV体外复制,但体外一定浓度范围内的苦参碱和苦参素对2.2.15细胞的HBV体外复制有良好的抑制作用,而且表现为对病毒基因翻译(蛋白抗原表达)的抑制作用优于对病毒基因复制 (DNA)的抑制作用,但过高浓度的苦参碱和苦参素可能因致细胞完整性破坏(坏死)而致病毒颗粒大量溢出进入细胞培养上清液,高浓度的肝炎灵虽致细胞毒性(凋亡)而细胞培养上清液病毒颗粒亦下调,原因可能是肝炎灵或仍然明显抑制HBV复制和基因产物表达;或因致细胞凋亡而病毒颗粒因凋亡细胞的胞膜完整性不能分泌进入细胞培养上清液。
结论:肝炎灵抗病毒效应与其说与其苦参类生物碱组分中的苦参碱和苦参素抗病毒作用有关,不如说更与其中其他苦参类生物碱组分甚至非苦参类生物碱组分如黄酮类等组分的抗病毒作用有关。